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细胞工程在香精香料中应用

 

 

细胞工程包括细胞融合技术、动物细胞工程和植物细胞工程等内容。植物细胞工程主要是指植物细胞培养(又称为植物组织培养),基本理论依据是细胞学说和细胞具有潜在的“全能性”的理论。植物细胞培养至今已有80多年的历史,利用植物细胞培养发酵具有广阔的应用前景。

香荚兰是世界上用得最广的香料。在利用植物细胞培养技术生产香兰素时,通过在培养基中添加一些植物激素,如2,4一二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic,2,4-D)、卡基腺嘌吟(benzyladenineBA)和蔡乙酸(naphthaleneaceticacid,NAA)等,愈伤组织发生率大大提高,而且所形成的愈伤组织的继代培养生长较好。
进行了香荚兰的细胞培养,将香荚兰的幼茎在MS+BA1pL+5p培养基上培养40d,其表而形成白色、块状的愈伤组织。愈伤组织在MS+2,4-D1pg/mL+BA1pg/mL+NAA4pg/mL+2.5%蔗糖的半固体培养基上快速增殖培养,培养4周后培养物的质量增加7倍左右;在相同培养基的悬浮培养中,培养4周后培养物的质量增加6-8倍。
氮源、碳源及吸附剂对香荚兰细胞悬浮培养产生香兰素的影响,结果表明,蔗糖比葡萄糖及果糖更适合作香荚兰细胞生长及产生香兰素的碳源,最佳蔗糖浓度为5%;当培养基中仅含KN03时,则有利于细胞的生长和香兰素的形成;培养液中去掉KN03,仅含NHQN03时,细胞生长和香兰素的形成均被抑制;培养基添加吸附剂后,香荚兰细胞产生的香兰素含量明显增加,活性碳的效果优于XAD-2,而且活性碳用量增加,香兰素的产量亦增加。还研究了培养基组成对香荚兰细胞悬浮培养产生香兰素的影响。结果发现,香荚兰细胞在全组成的MS培养基中香兰素含量均低于由矿物质盐组成培养基中的含量。
同时,采用植物细胞培养技术生产香兰素及其系列化合物时,会受到多种因素影响。外植体、使用培养基的类型、培养基中添加的前体物质的种类和数量、培养期的温度和光照的温度都会对代谢物的组成和产量有重要影响。

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